viernes, 11 de abril de 2014
Métodos neuroquímicos
Los métodos neuroquímicos pueden utilizarse para determinar la localización de una gran variedad de sustancias químicas en el cerebro. Con ellos se pueden identificar las neuronas que segregan sustancias neuroquímicas específicas (como neurotransmisores y neuromoduladores). Hay tres modos básicos: localizar las sustancias mismas, localizar las enzimas que las sistetizan o localizar el ARN mensajero involucrado en su síntesis.
Los péptidos o proteínas pueden localizarse directamente por medio de métodos inmunocitoquímicos.
Otra forma indirecta de localizar una sustancia es usar “hibridación in situ”: todos los péptidos y proteínas se sintetizan conforme a la información contenida en los cromosomas.
Localización de receptores específicos puede determinarse siguiendo dos procedimientos diferentes:
-En uno de ellos se usa la autorradiografía, se exponen secciones de tejido cerebral a una solución con un ligando radioactivo para un receptor específico. Después se enjuagan las secciones y se usan métodos de autorradiografía para localizar el ligando (y así, a los receptores).
-En el segundo procedimiento se aplica la inmunocitoquímica, de modo que los receptores son proteínas, y se pueden por tanto producir Ac frente a ellos. Se exponen las secciones de tejido cerebral al Ac adecuado y se observan al microscopio con una luz de longitud de onda adecuada.
Registro y estimulación de la actividad neuronal
Cuando los circuitos neuronales del encéfalo desempeñan sus funciones habituales se produce actividad electrica y metabólica.
Estos fenómenos eléctricos pueden registrarse, y los cambios en la actividad eléctrica de una región concreta se pueden usar para determinar si dicha región participa en el control de diversas conductas.
Los registros pueden realizarse crónicamente durante un largo periodo de tiempo después de que el animal se haya recuperado de la intervención, o de forma aguda durante un periodo de tiempo relativamente corto en el cual el animal permanece anestesiado. Los registros puden darse con:
-Microelectrodos: registra la actividad eléctrica de neuronas individuales.
-Macroelectrodos: registra los potenciales sinápticos de muchas células del área donde está el electrodo.
A veces esta actividad eléctrica se registra en el ser humano con electrodos pegados al cuero cabelludo y se muestra en un polígrafo. Estos registros se llaman electroencefalogramas (EEG). La imagen que aparece acontinuación es un encefalograma realizada a un niño.
Así, para estimarse la actividad metabólica podemos inyectar 2-DG radiactivo, que es transportado al interior de las células metabólicamente activas. Más tarde el animal será sacrificado y su encéfalo preparado para la autorradiografía, donde se pondrá de manifiesto la radioactividad de las células.
La actividad metabólica de un cerebro humano (vivo) también se puede ver con el método 2-DG, pero para detectar las regiones activas se utiliza una exploración con TEP
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